Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

19 октября 1979 г. N 2068-79

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФУНГИЦИДА БАЙЛЕТОНА МЕТОДОМ ТСХ В ПОЧВЕ,

КОРНЯХ, ЗЕЛЕНЫХ ЛИСТЬЯХ, ПЛОДАХ ТОМАТОВ И ОГУРЦОВ

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

 

1. Краткая характеристика препарата

 

Байлетон (синоним: триадимефон) - бесцветный порошок, не имеющий запаха, эффективен против большого спектра грибов, особенно мучнисторосяных.

Активное вещество байлетона: 1-(4-хлор-фенокси)3,3-диметил-1-(1Н-1,2,4-триазолил-1)-2-бутанон.

 

         ---

    Cl-//   \\O-CH-CO-C(CH )

       \ ___ /  │         3 3

         ---    N

               / \

              /   \N

              ││ ││

             N└───┘

 

    Молекулярная масса 293,7. Температура  плавления:  82,3 °С. Растворим в

воде  (0,026 г  действующего  вещества  на 100 г  растворителя  при 20 °С).

Хорошо растворяется в большинстве органических растворителей. Стабильность:

не разлагается в течение 24 часов при 20° в 0,1 н H SO  и NaOH.

                                                   2  4

    Байлетон, применяемый в  рекомендуемых нормах расхода, нетоксичен. ЛД

                                                                         50

для  крыс   при  оральном  введении  равно  2500 мг  д.в./кг  живого  веса.

Действующее начало фунгицида безвредно для пчел.

<...>

Пластинки для хроматографии "силуфол" размером 50 х 150 мм производство Чехословакии.

Пластинки стеклянные размером 50 х 150 мм с тонким слоем силикагеля.

Пульверизаторы для опрыскивания пластинок.

Ротационный испаритель ИР-1.

Сушильный шкаф.

Цилиндры мерные на 5, 10, 100 мл.

Часовое стекло.

 

2.4. Подготовка к определению

 

2.4.1. Получение химически чистого байлетона

Из торговой фирмы 25% смачивающегося порошка байлетона готовят насыщенный раствор в этиловом спирте, помещают его на водяную баню при 35 - 40 °С и оставляют до полного растворения препарата. Затем раствор отфильтровывают и упаривают до небольшого объема и оставляют в холодильнике для кристаллизации. Выпавшие кристаллы отфильтровывают, промывают охлажденным этиловым спиртом и высушивают на воздухе.

Дополнительным критерием степени чистоты препарата служит хроматографическая индивидуальность, при определении которой стандартные растворы, будучи нанесенными на пластинку в количестве 5 - 10 мкг, не содержат посторонних пятен после хроматографирования.

2.4.2. Приготовление пластинок

    Пластинки  тщательно  моются  хромовой  смесью,  промываются  проточной

водой,  затем  дистиллированной  и  сушат.  Покрывают  сорбционной  смесью,

состоящей  из 30 г силикагеля, 5 г сернокислого кальция и 100 куб. см воды.

(Силикагель  измельчают,  пропускают  через  сито  и  промывают  с  соляной

кислотой,  уксусной кислотой, дистиллированной водой до нейтральной реакции

на метилоранж. Один раз промывают метанолом, высушивают 2 часа на воздухе и

4  часа  сушат  в  сушильном  шкафу  при  120 °С. Получают силикагель с III

степенью   активности   по  Брокману.)  Сушат  пластинки  в  горизонтальном

положении  в  течение 18 - 20 час.  при  комнатной  температуре  и хранят в

эксикаторе над CaCl .

                   2

 

2.5. Проведение определения

 

2.5.1. Экстракция

Почва. 100 г воздушно-сухой, просеянной через сито с диаметром 1 - 2 мм почвы заливают ацетоном до покрытия пробы и оставляют на ночь в колбе с притертой пробкой или экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 2-х часов. Полученный раствор отфильтровывают. Остаток в колбе и на фильтре промывают небольшими порциями растворителя. Общий экстракт упаривают до небольшого объема и хроматографируют. Сильно окрашенные растворы обесцвечивают путем добавления 5 - 10 г активированного угля.

Растительный материал. 10 г листьев, 20 г корней или побегов, 50 г плодов растирают с кварцевым песком и безводным сернокислым натрием, заливают тем же растворителем (ацетоном) и обрабатывают аналогично пробам почвы. После этого добавляют уголь, вытяжку для лучшего ее обесцвечивания выдерживают 30 мин. на водяной бане при 35 - 40 °С, затем перемешивают на аппарате для встряхивания в течение 1 часа. Раствор отфильтровывают, высушивают сульфатом натрия, упаривают и хроматографируют.

Примечание: при работе с оводненными плодами после выпаривания ацетона довольно часто на дне колбы остается вода, которая при 70 °С не выпаривается. В таком случае надо:

1. Добавлять небольшие количества ацетона (через б/в сернокислый натрий), взбалтывать и снова выпаривать. Так 2 - 3 раза до окончательного объема 0,1 мл.

2. Вводный остаток с насыщенным раствором поваренной соли (NaCl) добавить хлороформ, равный по объему жидкости, и экстрагировать препарат в течение часа на аппарате для встряхивания. Отделить хлороформ, пропустить его через б/в сернокислый натрий, а к жидкости снова добавить такое же количество хлороформа и еще раз поставить на качалку на 30 мин. Экстракты объединить, выпарить и хроматографировать.

 

2.5.2. Хроматографирование

Сухие остатки растворяют в 0,1 мл (4 - 5 капель) ацетона и наносят на хроматограмму. Обмывают колбу 3 - 4 раза по 0,1 мл растворителя и опять наносят так, чтобы размеры пятен не превышали 5 - 6 мм. Слева и справа от пробы наносят 3 - 5 мкг стандартного раствора. Пластинку высушивают и опускают в хроматографическую камеру. Приготовляют одну из подвижных фаз, наливают на дно камеры и опускают пластинку. Готовую пластинку оставляют на воздухе для просушки и опрыскивания проявляющим реактивом.

    Байлетон  проявляется,  как  правило, в виде двух синих пятен на желтом

фоне  пластинки  с  R    -  0,22  и  R    - 0,56 на пластинке "силуфол"; на

                     f1               f2

силикагеле соответственно - 0,16 и 0,44.

 

2.6. Обработка результатов анализа

 

Полуколичественное определение проводится путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы и стандартных растворов. Для получения количественных данных содержание байлетона определяют путем измерения площади пятен на хроматограмме с помощью кальки, протертой вазелиновым или растительным маслом. Площадь пятна высчитывают методом наложения кальки на миллиметровую бумагу.

Расчет результатов анализа производят по формуле:

 

                                  A х S

                                       пробы

                            X = --------------,

                                B х S

                                     стандарта

 

    где:

    X - содержание препарата в пробе в мкг/г или мг/кг веса;

    A  -  количество  препарата,   найденное  путем  визуального  сравнения

размера и интенсивности пятен пробы и стандартного раствора в мкг;

    B - вес или объем исследуемой пробы;

    S      - площадь пятна анализируемой пробы в кв. мм;

     пробы

    S          - площадь пятна стандартного раствора в кв. мм.

     стандарта

 

2.7. Требования безопасности

 

Необходимо соблюдать требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями, концентрированными кислотами.

Строго руководствоваться "Правилами по технике безопасности в химических лабораториях".

Примечание. ДОК и ПДК байлетона не установлены.

 

2.8. Литература

 

Specht W. Methode zur gaschromatographischen Bestimming der Fungizide Fuberidazol, Fluotrimazol und Triadimefon in Pflanzen und Boden-Pflanzenschutz Nachr. Bayer, 1977, 30, 1: 55 - 71.

Настоящие Методические указания по определению остаточных количеств фунгицида байлетона в почве, корнях, зеленых листьях, плодах томатов и огурцов методом ТСХ разработаны:

1) Бажановой Ниной Васильевной - ст.н.с. в лаборатории биохимии растений и вредных организмов института защиты растений МСХ Армянской ССР.

2) Аветисян Каринэ Вараздатовной - мл.н.с. в лаборатории биохимии растений и вредных организмов института защиты растений МСХ Армянской ССР.

3) Папоян Фрунзе Артаваздовичем - зав. отдела фитопатологии института защиты растений МСХ Армянской ССР.