Утверждены

Минздравом СССР

20 декабря 1976 г. N 2542-76

28 января 1980 г. N 2145-80

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СИММ-ТРИАЗИНОВЫХ ГЕРБИЦИДОВ (СИМАЗИНА,

АТРАЗИНА, ПРОПАЗИНА, ПРОМЕТРИНА, СЕМЕРОНА, МЕЗОРАНИЛА,

МЕТАЗИНА, МЕТОПРОТРИНА, ПРИМАТОЛА-М) В ЗЕРНЕ КУКУРУЗЫ,

ВОДЕ И ПОЧВЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

Краткая характеристика препаратов представлена в таблицах 154 и 155.

 

Таблица 154

 

 

ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕРБИЦИДОВ ГРУППЫ СИММ-ТРИАЗИНОВ

 

┌─────────┬──────────┬─────────────────────┬─────────┬───────┬─────────┬──────────┬────────────────┐

│Торговое │Общеприня-│     Химическое      │Брутто-  │Молеку-│ Т. пл.  │ Давление │  Растворимость │

│название │тое       │      название       │формула  │лярная │         │ пара, Па │ при 20, 27 °С, │

│         │название  │                     │         │масса  │         │          │     г/100 г    │

├─────────┼──────────┼─────────────────────┼─────────┼───────┼─────────┼──────────┼────────────────┤

│    1    │    2     │          3          │    4    │   5   │    6    │    7     │        8       │

├─────────┼──────────┼─────────────────────┼─────────┼───────┼─────────┼──────────┼────────────────┤

│         │          │                     │         │       │         │        -5│                │

│Гезалакс │Аметрин   │2-Изопропиламино-6-  │C H  N S │227,3  │84 - 85  │2,5 x 10  │0,018 (вода)    │

│         │          │метилтио-4-этиламино-│ 9 17 5  │       │         │          │1,8 (метанол)   │

│         │          │1,3,5-триазин        │         │       │         │          │5,8 (хлороформ) │

│         │          │                     │         │       │         │          │1,2 (эфир)      │

│         │          │                     │         │       │         │          │                │

│         │          │                     │         │       │         │        -6│                │

│Мезоранил│Азипротрин│2-Азидо-4-метилтио-6-│C H  N S │225,3  │91 - 93  │2,7 x 10  │0,005 (вода)    │

│         │          │изопропиламино-1,3,5-│ 7 11 7  │       │         │          │2,2 (метанол)   │

│         │          │триазин              │         │       │         │          │                │

│         │          │                     │         │       │         │          │                │

│         │          │                     │         │       │         │        -6│                │

│Атразин, │Атразин   │2-Хлор-4-этиламино-6-│C H  N Cl│215,0  │176      │7,6 x 10  │0,007 (вода)    │

│гезаприм │          │изопропиламино-1,3,5-│ 8 15 5  │       │         │          │5,2 (хлороформ) │

│         │          │триазин              │         │       │         │          │1,2 (эфир)      │

│         │          │                     │         │       │         │          │1,8 (метанол)   │

│         │          │                     │         │       │         │          │0,036 (пентан)  │

│         │          │                     │         │       │         │          │                │

│         │          │                     │         │       │         │        -4│                │

│Семерон  │Десметрин │2-Метилтио-4-        │C H  N S │213,3  │84 - 86  │1,3 x 10  │0,058 (вода),   │

│         │          │изопропиламино-6-    │ 8 15 5  │       │         │          │хорошо растворим│

│         │          │метиламино-1,3,5-    │         │       │         │          │в большинстве   │

│         │          │триазин              │         │       │         │          │органических    │

│         │          │                     │         │       │         │          │растворителей   │

│         │          │                     │         │       │         │          │                │

│         │          │                     │         │       │         │        -7│                │

│Приматол │Пропазин  │2-Хлор-4,6-бис-      │C H  ClN │229,7  │212 - 214│6,7 x 10  │0,001 (вода)    │

│П,       │          │(изопропиламино)-    │ 9 16   5│       │         │          │0,5 (эфир)      │

│гемазин  │          │1,3,5-триазин        │         │       │         │          │                │

│         │          │                     │         │       │         │          │                │

│         │          │                     │         │       │         │        -5│                │

│Гезагард │Прометрин │2-Метилтио-4,6-бис-  │C  H  N S│241,4  │118 - 120│3,2 x 10  │0,048 (вода),   │

│         │          │(изопропиламино)-    │ 10 19 5 │       │         │          │хорошо растворим│

│         │          │1,3,5-триазин        │         │       │         │          │в большинстве   │

│         │          │                     │         │       │         │          │органических    │

│         │          │                     │         │       │         │          │растворителей   │

│         │          │                     │         │       │         │          │                │

│         │          │                     │         │       │         │        -7│                │

│Тетразин,│Симазин   │2-Хлор-4,6-бис-      │C H  ClN │201,7  │223 - 225│1,2 x 10  │0,5 (вода)      │

│бладекс, │          │(этиламино)-1,3,5-   │ 7 12   5│       │         │          │0,03 (эфир)     │

│гезаприм │          │триазин              │         │       │         │          │                │

│         │          │                     │         │       │         │          │                │

│         │          │                     │         │       │         │        -4│                │

│Игран    │Тербутрин │2-Трет-(бутиламино)- │C  H  N S│241,4  │104 - 105│1,3 x 10  │0,0006 (вода)   │

│         │          │4-метилтио-6-        │ 10 19 5 │       │         │          │0,04 (метанол)  │

│         │          │этиламино-1,3,5-     │         │       │         │          │                │

│         │          │триазин              │         │       │         │          │                │

└─────────┴──────────┴─────────────────────┴─────────┴───────┴─────────┴──────────┴────────────────┘

 

Таблица 155

 

КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРЕПАРАТОВ

 

┌──────────┬───────────────────┬──────────────┬─────┬─────────────┬──────────────┬─────────┬──────┐

│ Торговое │Химическое название│Брутто-формула│  Т. │Растворимость│Растворимость │  МДУ в  │ПДК в │

│ название │                   │(молекулярная │ пл.,│ в воде при  │в органических│продуктах│воде, │

│препарата │                   │     масса)   │ °C  │ 20 °C, мг/л │растворителях │питания, │мг/л; │

│          │                   │              │     │             │              │  мг/кг  │почве,│

│          │                   │              │     │             │              │         │мг/кг │

├──────────┼───────────────────┼──────────────┼─────┼─────────────┼──────────────┼─────────┼──────┤

│Метазин   │2-N-Метил-N-циано- │C  H  NS      │112 -│10           │-             │Картофель│-     │

│          │4,6-бис-изопропи-  │ 11 19        │115  │             │              │0,05     │      │

│          │ламино-симм-триазин│(249,4)       │     │             │              │         │      │

│          │                   │              │     │             │              │         │      │

│Газаран   │2-Изопротринамино- │C  H  N O     │68 - │320          │Хорошая в     │-        │-     │

│(мето-    │2-метилтио-6-      │ 11 21 5      │70   │             │большинстве   │         │      │

│протрин)  │метоксипропиламино-│(271,4)       │     │             │органических  │         │      │

│          │симм-триазин       │              │     │             │растворителей │         │      │

│          │                   │              │     │             │              │         │      │

│Приматол-М│2-Трет-бутиламино- │C H  ClN      │177 -│5            │То же         │-        │-     │

│(тербутри-│4-хлор-6-этиламино-│ 6 16   5     │179  │             │              │         │      │

│азин)     │симм-триазин       │(229,8)       │     │             │              │         │      │

└──────────┴───────────────────┴──────────────┴─────┴─────────────┴──────────────┴─────────┴──────┘

 

 

Примечание. В скобках - общепринятое название препарата.

 

Принцип метода. Метод основан на извлечении симм-триазиновых гербицидов из зерна кукурузы этилацетатом, из почвы - ацетоном, а из воды - бензолом, очистке экстракта из зерна на колонке с оксидом алюминия, из почвы - перераспределением в хлороводородную кислоту, а затем, после подщелачивания раствора, - в хлороформ с последующим определением ГЖХ с ТИД.

Метрологическая характеристика метода представлена в таблице 156. Предел обнаружения мезоранила, метопротрина 2 мкг, других симм-триазинов 1 мкг в пробе.

 

Таблица 156

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

 

┌───────────┬──────┬────────────┬───────────┬───────────┬─────────────────┐

│  Препарат │Объект│   Предел   │  Среднее  │Стандартное│  Доверительный  │

│           │      │определения,│ значение  │отклонение │интервал среднего│

│           │      │ мг/кг или  │определения│    при    │  при p = 0,95,  │

│           │      │    мг/л    │    при    │ p = 0,95, │     n = 5, %    │

│           │      │            │ n = 15, % │ n = 15, % │                 │

├───────────┼──────┼────────────┼───────────┼───────────┼─────────────────┤

│Пропазин   │Зерно │0,04        │90,7       │+/- 9,0    │90,7 +/- 11,2    │

│           │Почва │0,01        │79,0       │+/- 13,0   │79,0 +/- 16,7    │

│           │Вода  │0,001       │83,7       │+/- 7,5    │83,7 +/- 9,3     │

│Атразин    │Зерно │0,04        │90,7       │+/- 8,1    │90,7 +/- 10,3    │

│           │Почва │0,01        │79,0       │+/- 5,6    │79,0 +/- 7,2     │

│           │Вода  │0,001       │84,7       │+/- 6,3    │84,7 +/- 7,8     │

│Симазин    │Зерно │0,04        │83,9       │+/- 10,1   │83,9 +/- 12,6    │

│           │Почва │0,01        │84,9       │+/- 5,4    │84,9 +/- 6,9     │

│           │Вода  │0,001       │80,9       │+/- 6,7    │80,9 +/- 8,3     │

│Прометрин  │Зерно │0,04        │87,0       │+/- 8,3    │87,0 +/- 10,3    │

│           │Почва │0,01        │83,5       │+/- 5,1    │83,5 +/- 6,6     │

│           │Вода  │0,001       │83,6       │+/- 5,8    │83,6 +/- 7,2     │

│Приматол-М │Зерно │0,04        │90,7       │+/- 8,1    │90,7 +/- 10,0    │

│           │Вода  │0,001       │86,2       │+/- 6,1    │86,2 +/- 7,4     │

│Семерон    │Почва │0,01        │83,3       │+/- 5,1    │83,3 +/- 6,6     │

│           │Вода  │0,001       │84,7       │+/- 6,3    │84,7 +/- 7,8     │

│Мезоранил  │Почва │0,02        │80,3       │+/- 5,6    │80,3 +/- 7,2     │

│           │Вода  │0,002       │90,7       │+/- 8,1    │90,7 +/- 10,1    │

│Метазин    │Почва │0,01        │80,7       │+/- 6,5    │80,7 +/- 8,4     │

│           │Вода  │0,001       │83,7       │+/- 7,5    │83,7 +/- 9,3     │

│Метопротрин│Почва │0,02        │87,6       │+/- 10,9   │87,6 +/- 14,0    │

│           │Вода  │0,002       │79,0       │+/- 5,9    │79,0 +/- 7,2     │

└───────────┴──────┴────────────┴───────────┴───────────┴─────────────────┘

 

Избирательность метода. Метод селективен. Фосфорорганические пестициды не мешают определению. Избирательность метода обеспечивается сочетанием альтернативных колонок с неподвижными фазами равной полярности.

Реактивы и материалы. Ацетон ч.д.а. свежеперегнанный. Хлороформ ч.д.а. свежеперегнанный. Этилацетат ч.д.а. свежеперегнанный. Бензол ч.д.а. свежеперегнанный. Оксид алюминия нейтральный или щелочной, II степени активности по Брокману. Хлороводородная кислота х.ч., 0,1 н раствор. Гидроксид натрия х.ч., 0,5 н раствор. Гидроксид калия х.ч., 4 н раствор. Хлорид натрия х.ч. Сульфат натрия х.ч. Хроматон N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм) с 2,5% апьезона L + 2,5% карбовакса 20 М. Хроматон N-супер (0,16 - 0,20 мм) с 3% SE-30. Хроматон N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм) с 2% ПДЭГС. Азот особой чистоты из баллона. Водород, получаемый из баллона или из генератора водорода. Воздух, получаемый из баллона или нагнетаемый компрессором.

Стандартные растворы гербицидов в ацетоне: раствор 1 - пропазина, атразина, симазина, прометрина, семерона, приматола-М, метазина - по 100 мкг/мл; метопротрина, мезоранила - по 200 мкг/мл. Для приготовления стандартного раствора 1 в мерную колбу на 100 мл взвешивают последовательно с точностью +/- 0,0002 г по 10 мг пропазина, атразина, симазина, прометрина, семерона, метазина, приматола-М, а затем по 20 мг метопротрина и мезоранила. Содержимое колбы растворяют в небольшом количестве ацетона, а затем доводят до метки тем же растворителем.

Раствор 2 - пропазина, атразина, симазина, прометрина, семерона, приматола-М - по 10 мкг/мл; метопротрина, мезоранила - по 20 мкг/мл. Для приготовления раствора 2 из раствора 1 в мерную колбу на 100 мл пипеткой переносят 10 мл и доводят до метки ацетоном.

Раствор 3 - пропазина, атразина, симазина, прометрина, семерона, приматола-М - по 0,5 мкг/мл (нг/мкл); метопротрина, мезоранила - по 1 мкг/мл (нг/мкл). Для приготовления раствора 3 из раствора 2 в мерную колбу на 100 мл пипеткой отбирают 0,5 мл, доводят до метки ацетоном.

Все растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 мес.

Приборы, аппаратура и посуда. Хроматограф "Цвет-106" или аналогичный прибор с ТИД. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Генератор водорода. Кофейная мельница. Воронки делительные на 250, 1500 мл. Колбы: мерные на 100 мл; круглодонные на 500 мл; плоскодонные на 100, 500 мл; грушевидные на 50 мл. Мензурки на 25, 50 мл. Пипетки на 1, 10 мл. Пробирки стеклянные. Микрошприц. Почвенное сито.

Подготовка к определению. Приготовление носителя с 2,5% апьезона L и 2,5% карбовакса 20 М. В круглодонную колбу на 500 мл берут навеску апьезона L (2,5 г) и карбовакса 20 М (2,5 г), взятую с точностью +/- 0,02 г, и растворяют в 200 мл хлороформа. В полученный раствор при непрерывном помешивании постепенно высыпают 95 г хроматона N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм). Раствор жидкой фазы по объему должен быть в 2 раза больше (минимально) насыпного объема сорбента. С помощью ротационного вакуумного испарителя при слабом нагревании водяной бани растворитель удаляют. После того как носитель при вращении колбы начинает легко осыпаться со стенок колбы, его переносят в фарфоровую чашку и выдерживают в сушильном шкафу при температуре 60 - 70 °C в течение 1 ч. После охлаждения в эксикаторе носитель пересыпают в склянку с плотно закрывающейся пробкой.

Заполнение колонок носителем, кондиционирование колонки и подготовку хроматографа к работе проводят согласно инструкции.

Колонку для очистки экстракта заполняют на высоту 15 см окисью алюминия в этилацетате при открытом кране колонки. Избыток растворителя сбрасывают. Кран колонки закрывают, когда уровень растворителя будет находиться над слоем сорбента на высоте 3 - 4 мм.

Подготовка проб. Зерно кукурузы измельчают с помощью кофейной мельницы до размера частиц, равных размеру частиц манной крупы. Для анализа берут 25 г измельченного зерна.

Пробу почвы просеивают через почвенное сито и анализируют в естественно-влажном состоянии. Воздушно-сухую почву увлажняют водой из расчета 20% от массы почвы. Для анализа отбирают навеску почвы в 100 г.

Ход анализа. Экстракция. Анализируемую воду (1 л) помещают в делительную воронку, добавляют 1 мл этилового спирта и по каплям 4 н раствор KOH до pH 8 - 10 и экстрагируют гербициды бензолом четыре раза порциями по 50 мл. Перед каждой экстракцией в воду добавляют по 1 мл этилового спирта. Объединенные бензольные экстракты сушат над безводным сульфатом натрия. Экстракты фильтруют небольшими порциями в грушевидную колбу на 50 мл и с помощью ротационного вакуумного испарителя концентрируют раствор до объема 1 - 2 мл. Последнюю порцию экстракта упаривают досуха. К сухому остатку пипеткой добавляют 2 мл ацетона, колбу закрывают пришлифованной пробкой и тщательно смывают стенки колбы растворителем. В хроматограф вводят 2 - 5 мкл полученного раствора.

Навеску почвы (100 г) помещают в плоскодонную колбу на 500 мл, заливают 200 мл ацетона и экстрагируют гербициды в течение 1 ч с помощью механического встряхивания. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в круглодонную колбу на 500 мл. Операцию повторяют еще 2 раза 200 и 100 мл ацетона, встряхивая почву с растворителем по 1 ч. Каждую порцию экстракта концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 1 - 2 мл. К последней порции сконцентрированного экстракта добавляют 30 мл 0,1 н HCl. Раствор фильтруют через бумажный фильтр в делительную воронку на 250 мл и промывают колбу и фильтр двумя порциями по 15 мл 0,1 н HCl. К объединенному солянокислому раствору добавляют 2 мл 4 н раствора KOH до pH 8 - 10. Гербициды извлекают из водного раствора двойной экстракцией хлороформом порциями по 30 мл. После разделения слоев водный слой отбрасывают, а объединенный хлороформный слой сушат над безводным сульфатом натрия. Высушенный экстракт порциями фильтруют в грушевидную колбу на 50 мл и с помощью ротационного вакуумного испарителя концентрируют экстракт до объема 1 - 2 мл. Сульфат натрия промывают небольшим количеством хлороформа. Последнюю порцию растворителя отгоняют досуха. К сухому остатку пипеткой добавляют 2 мл ацетона, колбу закрывают пришлифованной пробкой и тщательно смывают стенки колбы растворителем. В хроматограф вводят 2 - 5 мкл полученного раствора.

Навеску измельченного зерна кукурузы (25 г) помещают в плоскодонную колбу на 250 мл, заливают 50 мл этилацетата и экстрагируют гербициды в течение 1 ч с помощью механического встряхивания колбы. Экстракт фильтруют в круглодонную колбу на 250 мл. Экстракцию проводят еще 2 раза этим же количеством растворителя. Объединенный экстракт упаривают до объема 1 - 2 мл при помощи ротационного вакуумного испарителя. Остаток количественно при помощи ацетона переносят в пробирку, помещают ее на водяную баню с температурой 70 - 80 °C и отгоняют растворитель до объема ~ 2 мл. Сконцентрированный экстракт количественно переносят на хроматографическую колонку с оксидом алюминия. Гербициды элюируют из колонки 100 мл этилацетатом и со скоростью 60 кап./мин. в грушевидную колбу. Этилацетат добавляют в колонку небольшими порциями. Элюат концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя досуха. К сухому остатку пипеткой добавляют 2 мл ацетона, колбу закрывают пришлифованной пробкой и тщательно смывают стенки колбы растворителем. В хроматограф вводят 2 мкл полученного раствора. В случае получения очень жирных экстрактов проводят дополнительную очистку с хлороводородной кислотой, как описано для почвы.

Условия хроматографирования. Хроматограф "Цвет-106" с ТИД. Скорость протяжки ленты самописца 0,33 см/мин.

Колонка I основная, стеклянная, длиной 180 см, внутренним диаметром 3,5 мм заполнена хроматоном N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм) с 2,5% апьезона L + 2,5% карбовакса 20 М.

Колонка II альтернативная, стеклянная, длиной 150 см, внутренним диаметром 3,5 мм заполнена хроматоном N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм) с 2% ПДЭГС.

Колонка III альтернативная, стеклянная, длиной 150 см, внутренним диаметром 3,5 мм заполнена хроматоном N-супер (0,16 - 0,20 мм) с 3% SE-30.

Другие условия хроматографирования приведены в таблице 157.

 

Таблица 157

 

УСЛОВИЯ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ

 

┌─────────────────────────────┬─────────────────┬────────────┬────────────┐

│           Параметры         │    Колонка I    │ Колонка II │Колонка III │

│                             │2,5% апьезона L +│  2% ПДЭГС  │  3% SE-30  │

│                             │ карбовакс 20 М  │            │            │

├─────────────────────────────┼─────────────────┼────────────┼────────────┤

│                             │      -10        │      -10   │      -10   │

│Рабочая шкала электрометра, А│5 x 10           │2 x 10      │5 x 10      │

│Температура, °C:             │                 │            │            │

│  колонки                    │230              │180         │180         │

│  испарителя                 │220              │200         │200         │

│Скорость потока, мл/мин.:    │                 │            │            │

│  азота                      │60               │75          │60          │

│  водорода                   │16               │18          │15          │

│  воздуха                    │150              │180         │150         │

│Время удерживания, мин.-с:   │                 │            │            │

│  пропазин                   │2-33             │4-33        │3-30        │

│  приматол-М                 │2-50             │-           │-           │

│  атразин                    │3-06             │6-10        │3-29        │

│  симазин                    │3-47             │8-10        │3-19        │

│  прометрин                  │4-00             │6-10        │6-30        │

│  семерон                    │4-51             │9-20        │5-27        │

│  мезоранил                  │6-37             │17-15       │4-40        │

│  метопротрин                │9-50             │31-10       │18-40       │

│  метазин                    │13-10            │29-35       │11-28       │

└─────────────────────────────┴─────────────────┴────────────┴────────────┘

 

В хроматограф вводят 2 - 5 мкл рабочего раствора. Линейность детектирования сохраняется в пределах: для пропазина, проматола-М, атразина, симазина, прометрина, семерона, метазина - 1 - 80 нг, метопротрина и мезоранила - от 2 до 200 нг.

Если при введении в хроматограф получаются слишком большие пики или происходит "зашкаливание", готовят более разбавленные растворы, добавляя в конечный рабочий раствор пипеткой дополнительное количество ацетона.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят методом соотношения со стандартами по высоте пиков.

Содержание гербицидов в анализируемой пробе (С, мг/кг или мг/л) вычисляют по формуле:

 

                             H  С  V

                              рп ст 2

                         С = --------,

                              H  V P

                               ст 1

 

    где:

    H  , H   - высоты  пиков  соответственно анализируемой пробы и

     рп   ст

стандарта, мм;

    V  - объем аликвоты, вводимой в хроматограф, мкл;

     1

    V  - конечный объем рабочего раствора, мл;

     2

    С   - содержание гербицида в стандарте, нг;

     ст

    P - навеска или объем анализируемой пробы, г или мл (для почвы

в пересчете на воздушно-сухую навеску).

Требования безопасности. Необходимо соблюдать правила безопасности, принятые для работы с пестицидами и легковоспламеняющимися жидкостями.

 

 

 

 

 

УНИФИЦИРОВАННАЯ МЕТОДИКА

ОПРЕДЕЛЕНИЯ СИММ-ТРИАЗИНОВ В МОЛОКЕ

МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

Краткая характеристика препаратов показана в таблице 154. ДСД аметрина 0,25 мг/кг; азипротрина 0,003 <*>; атразина 0,004; десметрина 0,1 <*>, пропазина 0,001 <*>, прометрина 0,001; симазина 0,1 мг/кг. Остаточные количества атразина в молоке не допускаются.

--------------------------------

<*> Временный норматив.

 

Принцип метода. Метод основан на определении симм-триазинов методом ГЖХ после экстракции препаратов из анализируемой пробы органическим растворителем и очистки экстракта в слое сорбента.

Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество препаратов методом ГЖХ зависит от характеристики детектора и колеблется в пределах 1 - 5 нг. Нижний предел определения 0,005 - 0,04 мг/л в зависимости от анализируемого симм-триазина, прибора, используемой хроматографической колонки. В диапазоне определяемых концентраций 0,005 - 0,04 мг/л. Среднее значение определения 86 +/- 12% (при p = 0,95, n = 5).

Избирательность метода. Метод избирателен в присутствии хлор- и фосфорорганических пестицидов.

Приборы и посуда. Для экстракции и очистки экстрактов. Мерная посуда 1-го класса точности. Воронки делительные на 200, 500, 1000 мл. Ротационный вакуумный испаритель с набором колб. Аппарат для встряхивания. Гомогенизатор типа "Ультра-Турракс" или аналогичный ему. Центрифуга. Хроматографические колонки (длина 300 мм, внутренний диаметр 12 мм). Конические колбы на шлифе вместимостью 50 мл. Муфельная печь (сушильный шкаф высокой температуры). Стеклянную посуду перед использованием кипятят в 20-процентном растворе бикарбоната натрия, тщательно промывают водой, 1-процентным раствором хлороводородной кислоты, затем многократно промывают дистиллированной водой.

Для газожидкостной хроматографии. Газовый хроматограф со стеклянной системой, ТИД. Колонки стеклянные, внутренний диаметр 2 - 3 мм, длина 1,0 и 1,8 м. Микрошприцы на 10 мкл.

Реактивы и растворы. Для экстракции и очистки экстрактов. Используют реактивы ч.д.а. Органические растворители предварительно дистиллируют (перегоняют). Ацетон. н-Гексан. Диэтиловый эфир. Бензол. Метанол. Хлороформ. Хлорид натрия, насыщенный водный раствор. Уксусная кислота, 10-процентный в.р. Гидроксид натрия, 0,1 н в.р. Сульфат натрия безводный. Оксид алюминия 45/100. Оксид алюминия щелочной по Брокману. Нагревают 5 ч при 500 °С и после охлаждения добавляют воду до 19% (весовых). Флоризил особой чистоты (60 - 100 меш). Нагревают 5 ч при 500 °С и после охлаждения добавляют воду до 8% (весовых). Рабочий стандартный раствор, содержащий по 0,5 - 5 мкг/мл симм-триазина в метаноле (или в смеси гексан-этанол 9:1). Хранят в холодильнике, готовят ежедневно.

Для газожидкостной хроматографии. Носитель - газ-хром Q (100 - 120 меш); хроматон N-AW-HMCS (0,16 - 0,20 мм). Неподвижные фазы - 3% карбовакс 20 М, 5% SE-30, 3% версамид 900, 5% ХЕ-60 и др.

Условия отбора, хранения проб и подготовка к анализу. Пробы хранят в холодильнике при температуре 0 - 5 °С. Срок хранения 5 дней.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Для экстракции и очистки экстрактов можно использовать любой из описанных ниже способов подготовки пробы - а и б.

Способ подготовки пробы а: к 50 мл молока в конической колбе прибавляют 50 мл метанола и 5 капель разбавленной уксусной кислоты. Гомогенизируют 2 мин., затем 15 мин. центрифугируют (относительное центробежное ускорение 2700). Отделяют твердый осадок, гомогенизируют еще дважды по 50 мл метанола и повторно центрифугируют. Водные экстракты объединяют, прибавляют 100 мл дистиллированной воды и 10 мл раствора хлорида натрия, хорошо перемешивают. К раствору прибавляют по каплям 0,1 н раствор гидроксида натрия до рН 7,5 - 8, переливают в делительную воронку и экстрагируют препараты трижды хлороформом порциями по 50 мл. Хлороформные экстракты сушат 20 г безводного сульфата натрия и концентрируют досуха при температуре 40 °С.

Для очистки экстрактов в хроматографическую колонку помещают 9 г оксида алюминия и 5 г флоризила в гексане. Сконцентрированный экстракт молока переносят из колбы в колонку с помощью 7 мл бензола и двумя порциями по 7 мл гексана и его отбрасывают. Симм-триазины элюируют 100 мл смеси гексан - эфир (2:1). Элюат концентрируют на ротационном испарителе до объема 2 мл. Затем его помещают в новую хроматографическую колонку, промывают несколько раз диэтиловым эфиром. Элюат концентрируют на ротационном испарителе при температуре бани 40 °С. Сухой остаток растворяют в 2 мл метанола и проводят определение методом ГЖХ.

Способ подготовки пробы б: к 50 мл молока прибавляют 50 мл ацетона и 2 мл уксусной кислоты, помещают на 1 ч в холодильник (0 - 4 °С). Раствор фильтруют через слой обезжиренной ваты, фильтрат переносят в колбу для упаривания и концентрируют при температуре бани не выше 50 °С. Оставшуюся водную часть переносят в делительную воронку, прибавляют 100 мл воды и по каплям 0,1 н раствор гидроксида натрия до рН 7,5 - 8. Препараты затем трижды экстрагируют хлороформом порциями по 50 мл. Хлороформный экстракт объединяют и концентрируют до объема 5 мл.

Для очистки экстрактов в колбу с хлороформом прибавляют 3 г оксида алюминия, хорошо встряхивают. Раствор фильтруют, оксид алюминия смывают несколько раз по 3 - 4 мл хлороформа. Хлороформ объединяют, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее проводят определение методом ГЖХ.

Методы аналитического определения. Хроматограф с ТИД. Условия хроматографирования могут меняться в зависимости от типа прибора, неподвижной фазы и других факторов. Подготовленную колонку перед работой кондиционируют при скорости потока азота 40 мл/мин. в течение 48 ч. Для насыщения вновь подготовленной колонки целесообразно вводить в испаритель поочередно в трех повторностях по 1 мкл стандартных растворов и по 1 мкл контрольной пробы образца.

В качестве примера приведем некоторые возможные варианты условий газохроматографического анализа.

Колонка 1 - 3-процентный карбовакс 20 М на газ-хром Q (100 - 120 меш, длина 1,8 м, внутренний диаметр 2 мм). Расход газа, мл/мин.: азота особой чистоты - 60; водорода - 3 - 4; воздуха - 60. Температура, °С: колонки - 200; испарителя - 220; детектора - 220.

При этих условиях относительное время удерживания (прометрин 1,00) составляет: пропазина - 0,68; атразина - 0,90; прометрина - 1,00; симазина - 1,17; десметрина - 1,41.

Колонка 2 - 5% SE-30 на хроматоне NW-HMCS (100 - 120 меш, длина 1 м, внутренний диаметр 3 мм). Расход газа, мл/мин.: азота особой чистоты - 35; водорода - 9 - 12; воздуха - 80. Температура, °С: колонки - 200; испарителя - 220.

При этих условиях относительное время удерживания (прометрин 1,00) составляет: атразина - 0,60; пропазина - 0,62; азипротрина - 0,70; прометрина - 1,00; тербутрина - 1,1; аметрина - 1,2.

Обработка результатов анализа. Количественный расчет проводят сравнением площадей пиков после калибровки рабочим стандартным раствором. В области 0,3 - 3,0 кг симм-триазинов имеется линейная зависимость между площадью пика и количеством вещества.

    Коэффициент  калибровки получают 5-кратным повторным введением

3  мкл  рабочего  стандартного раствора. Коэффициент калибровки К,

равный  отношению  количества вещества Q к соответствующей площади

пика  S    (среднее  арифметическое  из параллельных определений),

       ст

определяют для всех анализов ежедневно.

    Содержание  симм-триазинов  в пробе (X, мкг/л) рассчитывают по

формуле:

 

                             KS  V

                               пр 2

                         X = ------,

                              V P

                               1

 

    где:

    S   - площадь пика пробы, введенной в хроматограф, кв. мм;

     пр

    V  - объем пробы, вводимой в хроматограф, мкл;

     1

    V  - общий объем пробы, мл;

     2

    Р - объем пробы молока, мл;

    K - коэффициент калибровки, который вычисляют по формуле:

 

                                Q

                           К = ---,

                               S

                                ст

 

    где:

    Q  -  количество  вещества в стандартном растворе, введенном в

хроматограф, нг;

    S    -  площадь  пика  стандартного  раствора,  введенного   в

     ст

хроматограф, кв. мм.