Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1987 г. N 4337-87

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПСИНА-М И БМК ПРИ СОВМЕСТНОМ

ПРИСУТСТВИИ В ПЕРСИКАХ, ФЕЙХОА И ХУРМЕ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

 

--------------------------------

<*> Разработаны В.М. Григой, Е.Г. Дауровой (НИИЦиГС).

 

Краткая характеристика препаратов дана в Методических указаниях N 3164-84. Топсин-М, топсин-НФ-44. В процессе метаболизма и при гидролизе образуется биологически активное соединение - системный фунгицид БМК, метил-N-(2-бензимидазолил)-карбамат.

Принцип метода. Метод основан на определении метилтиофаната и БМК методом ТСХ после извлечения из растительного материала раствором азотной кислоты (pH 1) и очистке экстракта путем перераспределения в системе вода-хлороформ и в тонком слое силикагеля.

Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 107. Метод специфичен. Определению метилтиофаната в БМК не мешают другие пестициды, применяемые в сельском хозяйстве для защиты персика и субтропических культур.

 

Таблица 107

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТИЛТИОФАНАТА И БМК

 

┌──────────────────────┬──────────────┬───────────────────────────────────┐

│      Параметры       │   Пестицид   │       Анализируемый объект        │

│                      │              ├───────────┬───────────┬───────────┤

│                      │              │  персики  │  фейхоа   │   хурма   │

├──────────────────────┼──────────────┼───────────┼───────────┼───────────┤

│Диапазон определяемых │Метилтиофанат │0,04 - 0,20│0,03 - 0,20│0,04 - 0,20│

│концентраций, мг/кг   │БМК           │0,06 - 0,20│0,05 - 0,20│0,05 - 0,20│

│Предел обнаружения,   │Метилтиофанат │2,0        │0,9        │2,0        │

│мкг                   │БМК           │1,5        │1,4        │1,5        │

│Предел определения,   │Метилтиофанат │0,04       │0,03       │0,03       │

│мг/кг                 │БМК           │0,06       │0,05       │0,05       │

│Среднее значение      │Метилтиофанат │83,0       │85,8       │84,1       │

│определения, %        │БМК           │85,1       │87,1       │86,8       │

│Стандартное           │Метилтиофанат │+/- 9,0    │+/- 8,2    │+/- 8,4    │

│отклонение, %         │БМК           │+/- 8,8    │+/- 8,1    │+/- 8,4    │

│Доверительный интервал│Метилтиофанат │+/- 9,5    │+/- 7,8    │+/- 8,0    │

│среднего (p = 0,95,   │БМК           │+/- 9,3    │+/- 7,7    │+/- 8,0    │

│n = 6), %             │              │           │           │           │

└──────────────────────┴──────────────┴───────────┴───────────┴───────────┘

 

Реактивы и материалы. Азотная кислота ч. Вода дистиллированная. Вата обезжиренная гигроскопическая. Ацетон особой чистоты. Аммиак водный ч.д.а. Хлороформ. Бромфеноловый синий ч.д.а. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Этилацетат ч. Азотнокислое серебро, ч.д.а., 1-процентный водный раствор. Ледяная уксусная кислота х.ч. Этиловый спирт. Бумага фильтровальная. Стандартные растворы метилтиофаната и БМК в хлороформе (100 мкг/мл). Срок хранения в холодильнике 2 мес. Проявляющий реагент: 50 мл 1-процентного водного раствора азотнокислого серебра смешивают с 50 мл 0,05-процентного раствора бромфенолового синего в ацетоне. Хранят в холодильнике в течение месяца.

    Приборы,  аппаратура, посуда. Колбы: лабораторные конические на 250 мл;

круглодонные для отгонки растворителей на 100 мл. Аппарат для встряхивания.

Воронки  делительные  на  150 мл. Мерные цилиндры на 50 и 100 мл. Пластинки

"Силуфол"  УФ     или "Силуфол". Камера для хроматографирования. Испаритель

             254

ротационный.   Воронки  химические  на  150  мл.  Камера  для  опрыскивания

хроматографических пластинок. Пульверизатор стеклянный.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Навеску пробы 25 г тщательно измельчают, заливают 40 мл водного раствора азотной кислоты (pH 1) и экстрагируют в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Пробу выдерживают в течение 20 мин. при минус 4 °C и экстракт фильтруют через обезжиренную вату в делительную воронку. Остаток промывают 20 мл охлажденного водного раствора азотной кислоты. Экстракты объединяют, подщелачивают 10-процентным раствором водного аммиака до pH 7, добавляют в пробу 40 мл хлороформа и встряхивают 3 мин. После разделения фаз (10 мин.) хлороформный слой переносят через безводный сульфат натрия в колбу для отгонки растворителя на 100 мл и отгоняют при температуре 40 °C до 0,4 - 0,5 мл.

    Определение пестицидов методом ТСХ. Пробу наносят на хроматографическую

пластинку "Силуфол" УФ    или "Силуфол". Слева от пробы наносят стандартные

                      254

растворы  метилтиофаната  и  БМК и хроматографируют в системе растворителей

хлороформ-этилацетат-ледяная уксусная кислота в объемном соотношении 5:5:1.

Величина  R   метилтиофаната  0,51  +  0,03;  R   БМК  0,37 +/- 0,02. Можно

           f                                   f

использовать    систему   диэтиловый   эфир-гексан   (5:1).   Величина   R

                                                                          f

метилтиофаната  0,40 +/- 0,03;  R   БМК   0,12 +/- 0,3.  После  высушивания

                                 f

пластинки  нагревают  в  течение  10  мин.  при  70 °C, затем  обрабатывают

проявляющим реагентом. Фон пластинки обесцвечивают 2,5-процентным раствором

уксусной кислоты.  Линейность детектирования метилтиофаната  сохраняется  в

пределе  0,3 - 5,0 мкг,  БМК - 1,0 - 5,0 мкг.  Метилтиофанат  проявляется в

виде сиреневых пятен на желтом фоне, БМК - в виде синих пятен.  Обнаружение

пестицидов можно проводить в УФ-свете при использовании пластинок "Силуфол"

УФ   . Зоны локализации проявляются в виде сиреневых пятен. Нижние  пределы

  254

обнаружения составляют 1,0 мкг для обоих пестицидов.

Обработка результатов анализа. Количественно метилтиофанат и БМК определяют путем сравнения интенсивности окраски и размеров площади пятен исследуемого вещества в пробе и стандартного раствора. Содержание анализируемого соединения в плодах (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

 

                                  100 AS

                                        2

                              X = -------,

                                    S P

                                     1

 

    где:

    A - количество фунгицидов в стандартном растворе, мкг;

    S ,  S  -  площади  пятен соответственно стандартного раствора и пробы,

     1    2

кв. мм;

    P - масса исследуемой пробы, г.

Требования безопасности. Соблюдать общие правила по технике безопасности, необходимые при работе с химическими реактивами и пестицидами.