Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1987 г. N 4379-87

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ГЛИФОСАТА, ГЛИФОСИНА И ГЛИЦИНА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

    Краткая      характеристика     препаратов.     Глифосат     -

N-фосфонометилглицин.  Брутто-формула C H O PN. Молекулярная масса

                                       3 8 5

169,1.  Синоним  - раундап. Белое кристаллическое вещество. Т. пл.

230  °C  (с  разложением).  Нелетуч,  нерастворим  в  органических

растворителях,  плохо растворим в воде. В воздухе может находиться

в виде аэрозоля. ПДК в воздухе рабочей зоны 3,0 мг/куб. м.

    Глифосин  - бис-фосфонометилглицин. Брутто-формула C H  NO P .

                                                        4 11  8 2

Молекулярная масса 263,096. Белое кристаллическое вещество. Т. пл.

208  - 210 °C (с разложением). Нелетуч, нерастворим в органических

растворителях.  Плохо растворим в воде. В воздухе может находиться

в виде аэрозоля. ПДК в воздухе рабочей зоны не установлена.

    Глицин   -   аминоуксусная  кислота.  Брутто-формула  C H NO .

                                                           2 5  2

Молекулярная  масса  75,07. Белое кристаллическое вещество. Т. пл.

233  °C (с разложением). Малолетуч, плохо растворим в органических

растворителях.  Растворимость  в  воде  235 г  на 100 г. Возможный

метаболит  глифосина, глифосата. В воздухе может находиться в виде

аэрозоля. ПДК в воздухе рабочей зоны не установлена.

Принцип метода. Метод основан на определении препаратов методом ТСХ (пластинки "Силуфол") с использованием в качестве подвижной фазы смеси этанол - вода - водный аммиак (22:20:0,25) для определения глифосата и глицина, смеси изопропанол - вода - водный аммиак (6:6:1) - для глифосина с последующим обнаружением зон локализации глифосата и глицина нингидриновым реактивом, глифосина - о-толидиновым реактивом после реакции N-галогенирования.

Метрологическая характеристика метода. Нижний предел измерения в анализируемом объеме раствора, мкг: глифосата - 0,5; глифосина - 1,0; глицина - 0,25. Нижний предел измерения в воздухе (при отборе 200 л воздуха), мг/куб. м: глифосата - 0,25; глифосина - 0,50; глицина - 0,125. Диапазон измеряемых концентраций, мг/куб. м: глифосата - 0,25 - 2,5; глифосина - 0,50 - 5,0; глицина - 0,125 - 1,25. Граница суммарной погрешности измерения не превышает +/- 20%.

Избирательность метода. Определению не мешают соединения, применяющиеся в производстве, фосфор- и азотсодержащие гербициды, а также исследуемые соединения.

    Реактивы,  растворы,   материалы.   Глифосат  99,5-процентный.

Глифосин   99,5-процентный.   Глицин   х.ч.     Этиловый     спирт

96-процентный. Изопропиловый спирт ч. Бутиловый спирт  нормальный.

Водный аммиак ч.д.а.  Ледяная  уксусная  кислота.  Хлороводородная

кислота  х.ч.  Нингидрин   ч.д.а.  о-Толидин   ч.   Йодид   калия.

Перманганат  калия.  Фильтры  аэрозольные АФА-ВП-20 или АФА-ХП-20.

Пластинки "Силуфол" УФ   .

                      254

Подвижная фаза N 1 (для хроматографирования глифосата и глицина): смешивают этанол, воду, аммиак водный в соотношении 22:20:0,25; подвижная фаза N 2 (для хроматографирования глифосина): смешивают изопропанол, воду, аммиак водный в соотношении 6:6:1.

Проявляющий реагент N 1 (нингидриновый): 0,3 г нингидрина растворяют в 100 мл н-бутанола и приливают 3 мл ледяной уксусной кислоты. Реактив устойчив в течение 2 недель. Проявляющий реагент N 2 (хлор): получают в хроматографической камере смешиванием 1 - 2 г калия перманганата с 10 - 15 мл концентрированной хлороводородной кислоты непосредственно перед употреблением. Проявляющий реагент N 3 (о-толидиновый): 0,160 г о-толидина растворяют в 30 мл ледяной уксусной кислоты, добавляют 1 г йодида калия и доливают водой до 500 мл. Устойчив при хранении в темном месте в течение 2 недель.

Стандартный раствор N 1 смеси глифосата и глицина концентрации 1000 мкг/мл (для глифосата) и 500 мкг/мл (для глицина) готовят, растворяя навески 0,0500 г глифосата и 0,0250 г глицина в 50 мл водно-этанольной смеси (1:1). Раствор устойчив в течение недели. Стандартный раствор N 2 глифосина концентрации 1000 мкг/мл готовят, растворяя навеску 0,0500 г в 50 мл водно-этанольной смеси (1:1). Раствор устойчив в течение месяца.

Приборы, посуда. Аспирационное устройство. Фильтродержатель. Камеры хроматографические стеклянные. Пульверизаторы стеклянные. Микрошприцы. Микропипетки вместимостью 0,1 мл. Колбы мерные, цилиндры, мензурки. Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл. Пробирки градуированные с притертыми пробками вместимостью 5 мл. Стаканы химические вместимостью 50 мл. Лампа ПРК-4.

Условия отбора проб воздуха. Воздух со скоростью 7 - 10 л/мин. аспирируют через аэрозольный фильтр, помещенный в фильтродержатель. Для анализа отбирают 200 л воздуха. Срок хранения проб - неделя.

Ход анализа. Подготовка проб. Аэрозольный фильтр извлекают из фильтродержателя, помещают в химический стакан, заливают 2,5 мл водно-этаноловой смеси (1:1) и выдерживают 1 ч, периодически встряхивая или помешивая стеклянной палочкой. Экстракт сливают в градуированную пробирку. Экстракцию с фильтра повторяют 2,5 мл водно-этанольной смеси (1:1), выдерживая 1 ч при встряхивании и помешивании. Второй экстракт объединяют с первым. Доводят объем в пробирке точно до 5 мл водно-этанольной смеси (1:1), тщательно перемешивают.

Условия хроматографирования. По 0,05 мл полученного раствора наносят на хроматографические пластинки N 1 и 2. На те же пластинки наносят стандартные растворы по схеме: раствор для стандартных пятен глифосата и глицина - в 5 градуированных пробирок с помощью микрошприца или микропипетки вносят 0,05; 0,10; 0,20; 0,30; 0,50 мл стандартного раствора N 1 и доводят объем в каждой пробирке точно до 5 мл водно-этанольной смесью (1:1); раствор для стандартных пятен глифосина - в 5 градуированных пробирок вносят 0,10; 0,20; 0,50; 0,75; 1,0 мл стандартного раствора N 2 и доводят объем в каждой пробирке точно до 5 мл водно-этанольной смесью (1:1), раствор для стандартных пятен глифосина - в 5 градуированных пробирок вносят 0,10; 0,20; 0,50; 0,75; 1,0 мл стандартного раствора N 2 и доводят объем в каждой пробирке точно до 5 мл водно-этанольной смесью (1:1).

На линию стандарта пластинки N 1 наносят по 0,05 мл растворов из пробирок, приготовленных из стандартного раствора N 1, что соответствует 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 5,0 мкг глифосата и 0,25; 0,50; 1,0; 1,5; 2,5 мкг глицина.

На линию стандарта пластинки N 2 наносят по 0,05 мл растворов из пробирок, приготовленных из стандартного раствора N 2, что соответствует 1,0; 2,0; 5,0; 7,5; 10 мкг глифосина.

Пластинку N 1 помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой N 1, пластинку N 2 - с подвижной фазой N 2. После хроматографирования пластинки вынимают из камер, подсушивают в сушильном шкафу при температуре 40 - 50 °C.

    Пластинку  N  1  обрабатывают  проявляющим  реагентом  N  1  с

последующим  нагреванием  в  сушильном шкафу при температуре 110 -

120  °C.  Глифосат и глицин обнаруживают в виде розовых пятен с R

                                                                 f

0,60 и 0,50 соответственно. Окраска пятен устойчива.

    Пластинку N 2 помещают на 20 мин. под источник УФ-облучения, а

затем  на  5  мин.  -  в  пары проявляющего реагента N 2 (хлора) и

оставляют  в  вытяжном шкафу до полного исчезновения запаха хлора.

Далее  пластинку  орошают   проявляющим  реагентом  N 3.  Глифосин

обнаруживают  в  виде синих пятен на белом фоне с R  0,62. Окраска

                                                   f

пятен устойчива.

Количество глифосата, глифосина и глицина определяют, сравнивая интенсивность окраски и площадь пятен проб со стандартными, интенсивность окраски и площадь которых наиболее близки к пробам.

Обработка результатов анализа. Концентрацию глифосата, глицина и глифосина (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

 

                              GS V

                                1 2

                         X = -------,

                             S V V

                              2 1 20

 

    где:

    G   -   количество   вещества  в  стандарте,  наиболее  близко

подходящем к пробе, мкг;

    S ,  S   - площади пятен соответственно пробы и стандарта, кв.

     1    2

мм;

    V  - общий объем раствора пробы, мл;

     2

    V  - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;

     1

    V    -  объем  воздуха, отобранный для анализа и приведенный к

     20

стандартным условиям, л.

Требования безопасности. Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях.