Утверждены

Минздравом СССР

14 июля 1988 г. N 4655-88

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПСИНА-М В ПЕРСИКАХ, ФЕЙХОА, ХУРМЕ

И ЗЕЛЕНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ

ХРОМАТОГРАФИИ <*>

 

--------------------------------

<*> Разработаны Е.Г. Дауровой, В.М. Григой (НИИЦиГС).

 

Краткая характеристика препаратов дана в Методических указаниях N 3164-84.

Принцип метода. Метод основан на газохроматографическом определении метилтиофаната с ДПР на неподвижной фазе карбовакс 20 М после экстракции смесью хлороформ-ацетон и очистке экстракта путем перераспределения в системе водный этанол-хлороформ.

Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 108.

 

Таблица 108

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

 

┌────────────────────────────────────────────┬────────────────────────────┐

│                 Параметры                  │    Анализируемый объект    │

│                                            ├─────────────┬──────────────┤

│                                            │  персики,   │   зеленая    │

│                                            │хурма, фейхоа│растительность│

├────────────────────────────────────────────┼─────────────┼──────────────┤

│Диапазон определяемых концентраций, мг/кг   │0,02 - 0,12  │0,20 - 0,60   │

│Предел определения, мг/кг                   │0,02         │0,20          │

│Предел обнаружения, мкг                     │0,5          │1,0           │

│Среднее значение определений, %             │83,1         │73,6          │

│Стандартное отклонение, %                   │+/- 4,6      │+/- 7,7       │

│Доверительный интервал среднего (p = 0,95,  │+/- 5,7      │+/- 9,4       │

│n = 5), %                                   │             │              │

└────────────────────────────────────────────┴─────────────┴──────────────┘

 

Избирательность метода. Метод специфичен. Определению метилтиофаната не мешают другие соединения, применяемые для защиты персика и субтропических культур.

Реактивы и материалы. Хлороформ. Ацетон особой чистоты. Сульфат натрия безводный, ч.д.а. Этиловый спирт 60-процентный. Бумага фильтровальная. Вода дистиллированная. Стандартный раствор метилтиофаната в ацетоне (1 мкг/мл) - срок хранения в холодильнике 2 мес. Азот особой чистоты, газообразный. Карбовакс 20 М 15-процентный на хроматоне N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм). Алиезон-L 15-процентный на хроматоне N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм). Вата обезжиренная.

Приборы, аппаратура, посуда. Хроматограф "Цвет-100 М", модель 164 с ДПР. Ротационный вакуумный испаритель. Колбы: лабораторные конические на 250 мл; круглодонные для отгонки растворителей на 100 мл. Аппарат для встряхивания. Мерные цилиндры вместимостью 1 и 10 мл. Пробирки на 5 мл с притертыми пробками. Воронки делительные на 150 мл. Микрошприц на 10 мкл. Колонка спиральная стеклянная размером 100 x 0,3 см.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Навеску пробы плодов (25 г) измельчают, заливают 50 мл смеси растворителей хлороформ-ацетон в объемном соотношении 9:1 и экстрагируют в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют в круглодонную колбу на 250 мл через слой безводного сульфата натрия, нанесенного на вату. В остаток добавляют 25 мл смеси хлороформ-ацетон (9:1) и встряхивают еще раз в течение 15 мин. Экстракты объединяют, отгоняют на ротационном испарителе при температуре 40 °C до объема 0,2 - 0,4 мл и высушивают на воздухе досуха. Остаток тщательно растворяют в 0,40 - 0,45 мл хлороформа, вносят в колбу 5 мл охлажденного 60-процентного этилового спирта и перемешивают содержимое. Пробу фильтруют через смоченный водой фильтр в делительную воронку, а остаток в колбе последовательно промывают 3 мл 60-процентного этилового спирта, 10 мл дистиллированной воды, переносят через фильтр в ту же делительную воронку. В пробу добавляют 12 мл воды, 30 мл хлороформа и интенсивно встряхивают 3 мин. После разделения фаз (10 мин.) хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия и переносят его в колбу перегонного аппарата. Пробу концентрируют под вакуумом до 0,2 - 0,4 мл, а затем на воздухе досуха, добавляют 2 мл ацетона, перемешивают и вводят в хроматограф аликвоту объемом 2 - 5 мкл.

Пробу измельченной ножницами зеленой растительности (5 г) заливают 40 мл смеси растворителей хлороформ-ацетон (9:1) и далее анализ проводят по схеме описанной экстракции из плодов.

Хроматографирование. Условия хроматографирования приведены в таблице 109.

 

Таблица 109

 

УСЛОВИЯ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ

 

┌────────────────────────────────────────┬────────────────────────────────┐

│              Параметры                 │              Фаза              │

│                                        ├────────────────┬───────────────┤

│                                        │ карбовакс 20 М │   апиезон-L   │

│                                        │ 15-процентный  │ 15-процентный │

├────────────────────────────────────────┼────────────────┼───────────────┤

│Расход азота, мл/мин.                   │60              │60             │

│Температура, °C:                        │                │               │

│  испарителя                            │220             │220            │

│  термостата колонок                    │100             │80             │

│  детектора                             │230             │230            │

│Объем пробы, мкл                        │1 - 5           │1 - 5          │

│Время удерживания, с                    │130             │91             │

│Линейный динамический диапазон, нг      │0,5 - 3,0       │1,0 - 5,0      │

│                                        │      -9        │      -9       │

│Рабочая шкала электрометра, А           │4 x 10          │4 x 10         │

└────────────────────────────────────────┴────────────────┴───────────────┘

 

Обработка результатов анализа. Количественно пестицид определяют сравнением высот пиков исследуемого вещества и стандартного раствора. Содержание метилтиофаната (X, мг/кг) в анализируемой пробе вычисляют по формуле:

 

                                    AH V

                                      2 2

                                X = ------,

                                    H V P

                                     1 1

 

    где:

    A -  содержание препарата в объеме стандартного  раствора, введенном  в

хроматограф, нг;

    H ,   H  - высоты   пиков   соответственно   стандартного   раствора  и

     1     2

анализируемой пробы, мм;

    V  - объем аликвоты экстракта, введенный  в хроматограф, мкл;

     1

    V  - конечный объем экстракта пробы, мл;

     2

    P - навеска анализируемого образца, г.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.