Утверждены

Минздравом СССР

14 июля 1988 г. N 4656-88

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ БРОМОКСИНИЛА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТИТЕЛЬНОМ

МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

 

--------------------------------

<*> Разработаны А.Ф. Скурьятом, Л.В. Зубкевичем (БелНИИЗР).

 

    Краткая     характеристика    препарата.   Бромоксинил - 3,5-дибромо-4-

гидроксибензонитрил.  Брутто-формула  C H Br NO.  Молекулярная  масса  277.

                                       7 3  2

Химически  чистый  бромоксинил - белое  кристаллическое  вещество с  т. пл.

194 - 195 °C. Растворимость в воде 0,13 мг/л. Растворимость в  органических

растворителях  (г/л): метаноле - 90, этаноле - 70, ацетоне - 140, ксилоле -

700.  Эфиры  бромоксинила  в  биологических  средах быстро гидролизуются до

исходного фенола. ЛД   для крыс 190 мг/кг. Бромоксинил применяют в качестве

                    50

контактного  гербицида  на  зерновых  культурах  для  борьбы  с двудольными

сорняками, устойчивыми к 2,4-Д.

Принцип метода. Методика основана на извлечении гербицида из анализируемой пробы, очистке экстрактов с последующим ацетилированием бромоксинила уксусным ангидридом и количественном определении на хроматографе с ДПР.

Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество 0,5 нг, линейность детектирования сохраняется до 4 нг. Предел определения: в воде - 0,002 мг/л, почве - 0,01 мг/кг, растительном материале - 0,01 мг/кг. Среднее значение определения стандартных добавок гербицида (%): в воде - 94 +/- 2,3, почве - 82 +/- 2,8, растительном материале - 74 +/- 5,8. Доверительный интервал среднего (p = 0,95, n = 15): в воде - +/- 2,4%, почве - +/- 2,6, растительном материале - +/- 4,8%.

Избирательность метода. Определению не мешают другие пестициды, применяемые при интенсивных технологиях возделывания зерновых культур.

Реактивы и растворы. Серная кислота х.ч., 10-процентный раствор. н-Гексан х.ч. Гидроксид натрия х.ч., 0,1 и 0,01 н раствор. Ацетон ч. Сульфат натрия безводный х.ч. Хлороформ медицинский. Оксид алюминия нейтральный, L 5/40 мю. Хемапол. Уксусный ангидрид х.ч. Азот газообразный особой чистоты. Стандартный раствор бромоксинила (99,8-процентной чистоты) в ацетоне с содержанием 5 мкг/мл (хранят в холодильнике не дольше 2 недель).

Приборы и посуда. Хроматограф "Цвет-164" с ДЭЗ. Микроизмельчитель тканей. Ротационный испаритель. Центрифуга. Воронки делительные. Колбы остродонные на 50 мл. Колбы на 200 мл. Пипетки на 0,1 и 1,0 мл. Воронки химические. Пробирки КШ 14/23. Встряхиватель. Микрошприц на 10 мкл. Водоструйный насос. Стеклянные бюксы. Колонки для хроматографии стеклянные высотой 20 см с внутренним диаметром 2 см.

Подготовка к определению. Экстракция и очистка экстрактов. Анализируемую пробу воды (100 мл) в делительной воронке подкисляют 10-процентным раствором серной кислоты до pH 1 - 2 и экстрагируют хлороформом трижды порциями по 50 мл. Объединенные и осушенные безводным сульфатом натрия экстракты упаривают почти досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Остаток хлороформа удаляют током воздуха.

Пробу воздушно-сухой почвы (10 г) гомогенизируют в микроизмельчителе тканей с 50 мл 0,01 н NaOH в течение 2 мин. при скорости 5000 об./мин. Затем к суспензии добавляют 10 - 15 мл насыщенного раствора NaCl и центрифугируют 10 мин. со скоростью 4000 об./мин. Жидкость фильтруют в делительную воронку, а почву повторно гомогенизируют и центрифугируют. Объединенный водно-щелочной экстракт подкисляют и экстрагируют этилацетатом дважды порциями по 100 мл. Объединенные и осушенные экстракты упаривают на ротационном испарителе так же, как пробу воды.

Анализируемую пробу растительного материала (зеленая масса, солома, зерно) массой 10 г заливают 100 мл хлороформа и экстрагируют на встряхивателе в течение 1 ч. Хлороформ отфильтровывают, а пробу промывают хлороформом дважды порциями по 50 мл. Объединенные и осушенные экстракты концентрируют на испарителе до объема 1 - 2 мл и проводят очистку. Для этого хлороформный экстракт количественно переносят в широкий бюкс. Растворитель с 10 г оксида алюминия удаляют, помещая бюкс в термостат с температурой 50 °C. Затем сорбент тщательно перемешивают и переносят в хроматографическую колонку с ватным тампоном. Бромоксинил из колонки элюируют 300 мл 0,01 н NaOH под небольшим разрежением с помощью водоструйного насоса. Скорость вытекания 60 - 70 капель в минуту. Водно-щелочный раствор подкисляют серной кислотой до pH 1 - 2 и трижды экстрагируют хлороформом порциями по 50 мл. Объединенные хлороформные экстракты упаривают на ротационном испарителе.

Ход анализа. Ацетилирование бромоксинила. Сухие остатки при анализе проб воды, почвы и зерна, а также соломы и зеленой массы смывают 5 мл (5 раз по 1 мл) 0,1 н раствора NaOH в пробирки, добавляют по 0,2 мл уксусного ангидрида, раствор помещают на баню с температурой 70 °C на 10 мин. Затем пробирки охлаждают под струей воды, добавляют по 10 - 15 мл воды и 1 мл гексана, закрывают пробками и энергично встряхивают в течение 1 мин. Хроматографируют 1 - 5 мкл гексанового раствора. Стандартные растворы готовят следующим образом: в пробирки вносят известные количества стандартных растворов бромоксинила, ацетон удаляют током воздуха, добавляют по 5 мл 0,1 н NaOH и далее поступают так же, как и при ацетилировании рабочей пробы.

    Условия  хроматографирования. Хроматограф   "Цвет-164"   с ДПР-2. Шкала

                       -12

электрометра  50  x  10    А. Скорость протяжки диаграммной ленты 600 мм/ч.

Хроматографическая  колонка стеклянная спиральная длиной 1,8 м с внутренним

диаметром  3  мм,  заполненная 5% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS (0,20 - 0,25

мм)  или  колонка  длиной  1  м  с  диаметром 3 мм, заполненная 5% OV-17 на

хроматоне  N-супер (0,125 - 0,160 мм). Температура (°C): термостата колонок

-  190  (XE-60)  и 180 (OV-17), испарителя - 220, детектора - 260. Скорость

потока  азота  через  колонку 60 мл/мин., на поддув детектора - 150 мл/мин.

Время удерживания бромоксинила 4 мин. 45 с.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом. Содержание бромоксинила в пробе (X, мг/л, мг/кг) рассчитывают по формуле:

 

                                   C  S  V

                                    ст пр 1

                               X = --------,

                                    S  V P

                                     ст 2

 

    где:

    C   - содержание гербицида в стандартном растворе, нг;

     ст

    S   - площадь пика пробы, кв. мм;

     пр

    V  - объем гексанового экстракта, мл;

     1

    S   - площадь пика стандартного раствора, кв. мм;

     ст

    V  - объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл;

     2

    P - навеска пробы, г, мл.

Требования безопасности. При анализе необходимо соблюдать правила безопасности, рекомендуемые для работы с органическими растворителями и кислотами.