Утверждены

Минздравом СССР

14 июля 1988 г. N 4660-88

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТИЛТА В ПОЧВЕ И ЗЕРНЕ

МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

 

--------------------------------

<*> Разработаны Ф.И. Патрашку (ВНИИБМЗР); Е.Ю. Светкиной, А.И. Шарипжановой (ИХ АН МССР).

 

Краткая характеристика препарата дана в Методических указаниях N 3190-85.

Принцип метода. Метод основан на извлечении тилта органическим растворителем, очистке экстракта на колонке с оксидом алюминия, активированным углем и оксидом магния или сублимацией в вакууме с последующим количественным определением методом ГЖХ с ДПР.

Метрологическая характеристика метода. Пределы определения тилта в почве и зерне 0,05 мг/кг. Предел обнаружения в хроматографируемом объеме 1 нг. В таблице 140 представлена метрологическая характеристика метода.

 

Таблица 140

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

 

┌────────────────────────┬────────┬────────────┬───────────┬──────────────┐

│Метод очистки экстракта │Внесено,│  Среднее   │Стандартное│Доверительный │

│                        │ мг/кг  │  значение  │отклонение,│    предел    │

│                        │        │определения,│     %     │   среднего   │

│                        │        │     %      │           │  при n = 5,  │

│                        │        │            │           │ p = 0,95, %  │

├────────────────────────┴────────┴────────────┴───────────┴──────────────┤

│                                  Почва                                  │

│                                                                         │

│Хроматография на колонке│0,05    │91,8        │+/- 0,60   │91,8 +/- 1,9  │

│То же                   │0,10    │95,8        │+/- 1,17   │95,8 +/- 3,7  │

│-"-                     │1,00    │95,9        │+/- 0,50   │95,9 +/- 1,9  │

│Сублимация              │0,05    │91,4        │+/- 0,54   │91,4 +/- 1,7  │

│-"-                     │0,10    │93,7        │+/- 1,02   │93,7 +/- 3,2  │

│-"-                     │1,00    │95,6        │+/- 0,80   │95,6 +/- 2,5  │

│                                                                         │

│                                  Зерно                                  │

│                                                                         │

│Хроматография на колонке│0,95    │90,7        │+/- 0,55   │90,7 +/- 1,7  │

│То же                   │0,10    │93,8        │+/- 0,52   │93,8 +/- 1,7  │

│-"-                     │1,00    │96,1        │+/- 0,38   │96,1 +/- 1,2  │

└────────────────────────┴────────┴────────────┴───────────┴──────────────┘

 

Избирательность метода. Определению тилта не мешают хлорорганические пестициды.

Реактивы, растворы, материалы. Тилт х.ч. Ацетон особой чистоты. Хлористый метилен ч.д.а. Петролейный эфир ч. н-Гексан х.ч. Метанол х.ч. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Хлорид кальция х.ч. Хлорид натрия. Хроматон N-AW, силанизированный HMDS, с 5% XE-60. Азот газообразный особой чистоты в баллонах с редуктором. Азот газообразный ч. в баллонах с редуктором, регулятором давления и дросселем. Стандартные растворы тилта в ацетоне с содержанием 0,25; 1 и 10 мкг/мл, приготовленные из химически чистых веществ. Оксид алюминия для хроматографии ч. Оксид магния особой чистоты. Активированный уголь ОУ, марка "Б", технический.

Приборы и посуда. Хроматограф "Цвет-106", снабженный ДПР колонки для газовой хроматографии, внутренний диаметр 3,5 мм, длина 2 м. Ротационный вакуумный испаритель с набором колб. Колбы: мерные на 50; 100 и 250 мл; круглодонные или грушевидные на 50; 100 и 250 мл. Стаканы химические на 300 мл. Пипетки на 0,1; 1,5 и 2,0 мл с делениями. Хроматографическая колонка стеклянная диаметром 1,5 см, длиной 30 см. Аппарат для встряхивания. Вакуумный насос. Сублиматор стеклянный для сублимации в вакууме. Масляная баня с регулируемой температурой. Микрошприц на 10 мкл. Делительные воронки на 1 л.

Подготовка хроматографических колонок. Стеклянную колонку моют хромовой смесью, ополаскивают водой, промывают ацетоном, высушивают, заполняют сорбентом, используя водоструйный насос. Заполненную колонку кондиционируют в течение 10 ч при 1270 °C. Для очистки экстрактов хроматографическую колонку промывают хромовой смесью, ополаскивают водой и высушивают. Затем помещают ватный тампон, последовательно 7 см оксида алюминия, 1 см смеси активированного угля и оксида магния (1:3), сверху 2 см безводного сульфата натрия.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Отбирают среднюю пробу почвы массой 20 г. Помещают в стеклянную колбу, заливают 50 мл смеси ацетона с 0,05 н. водным раствором хлорида кальция (1:1). Пробу в течение 1 ч встряхивают на аппарате для встряхивания. Колбу с экстрактом помещают в морозильную камеру бытового холодильника на 1 ч. Затем экстракт фильтруют. Тилт трижды экстрагируют н-гексаном порциями по 30 мл. Гексановые фракции фильтруют через безводный сернокислый натрий в круглодонные колбы и упаривают досуха на ротационном испарителе при 35 °C.

Среднюю пробу зерна (20 г) помещают в стеклянную колбу, заливают 100 мл метанола и оставляют на ночь или интенсивно встряхивают в течение 2 ч. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр. Фильтрат переносят в делительную воронку, добавляют 20 мл насыщенного раствора хлорида натрия и 200 мл дистиллированной воды. Экстрагируют трижды хлористым метиленом порциями по 50; 50 и 20 мл. Органическую фазу объединяют и сушат, фильтруя через безводный сульфат натрия. Органическую фазу упаривают досуха на ротационном испарителе при 35 °C. В связи с тем, что наибольшие потери анализируемого препарата происходят на конечной стадии удаления растворителя, удаление растворителя проводят до тех пор, пока в колбе останется ~ 0,2 мл жидкости. Затем пробирку вынимают из бани и последние капли растворителя удаляют вращением ее в руках.

Очистка на колонке. Подготовленную колонку элюируют 40 мл элюента ацетон-петролейный эфир-хлористый метилен (1:2:2), элюат отбрасывают. Остаток пробы после упаривании растворяют в 2 мл смеси ацетона и петролейного эфира (1:1) и вносят в колонку. Дают раствору впитаться и элюируют 80 мл смеси ацетона, петролейного эфира и хлористого метилена (1:2:2). Для ускорения элюирования можно применять микронасос "Скалярий", а также водоструйный насос. Скорость элюирования должна быть не более 2 мл/мин. Первые 10 мл элюата отбрасывают, а остальные 70 мл концентрируют досуха, как описано выше. Затем растворяют в определенном количестве ацетона и вводят в хроматограф.

Очистка экстракта путем сублимации. Приготовленные экстракты количественно переносят в стеклянный "палец" для сублимации. Упаривают растворитель, затем подключают к вакуумному насосу, включают водяное охлаждение. Сублимацию проводит в течение 30 мин. при температуре 130 °C и давлении 1333,2 Па (10 мм рт. ст.). Сублимированный тилт количественно переносят в круглодонную колбу и упаривают досуха, а затем разбавляют в определенном количестве ацетона и вводят в хроматограф.

    Условия    хроматографирования.    Газохроматографическое   определение

проводят  на  газовом  хроматографе  с  ДПР.  Колонка  стеклянная диаметром

3,5 мм,  длиной  2 м,  носитель - хроматон  N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм) с 5%

XE-60.   Скорость   потока   продувочного  газа  -  азот  особой  чистоты -

160 мл/мин., газоносителя - азота особой чистоты - 50 мл/мин.  Температура,

°C: детектора - 250,  испарителя - 250,  колонок - 235.  Время  удерживания

препарата 8 мин. 23 с.  Скорость  диаграммной ленты потенциометра 240 мм/ч,

                              -12

Шкала   электрометра  200 x 10    А.   В   хроматограф  вводят   поочередно

стандартный и анализируемый раствор в количестве 3 мкл. Соотношение объемов

подбирают таким образом,  чтобы  высоты  пиков  были примерно  одинаковыми.

Количественное  определение проводят по высотам пиков.

    Обработка  результатов  анализа.  Содержание  тилта  в  почве  и  зерне

(X, мг/кг) определяют по формуле:

 

                                   H  C  V

                                    пр ст

                               X = -------,

                                   H  V P

                                    ст 1

 

    где:

    H   - высота пика анализируемого экстракта, мм;

     пр

    C   - количество стандарта, введенного в хроматограф, нг;

     ст

    V - объем экстракта пробы, мл;

    H   - высота пика стандартного раствора, мм;

     ст

    V  - объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл;

     1

    P - навеска пробы, г.

Требования безопасности. Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также правила, принятые для работ с пестицидами.