Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 5007-89

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СУМИ-АЛЬФА В ВОДЕ, ПЛОДОВЫХ

И ОВОЩНЫХ КУЛЬТУРАХ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ <*>

 

--------------------------------

<*> Разработаны Д.Б. Гиренко, Л.Е. Морару (ВНИИГИНТОКС).

 

Дополнение к N 2473-81 от 22.10.81.

Краткая характеристика препарата. Суми-альфа - фенвалерат-RS-альфа-циано-3-феноксибензил-(RS)-2-(4-хлорфенил)-3-метилбутират. Активный изомер рацемического фенвалерата (см. с. 297). Жидкость светло-желтого цвета. Растворим в ксилоле, ацетоне, циклогексаноне, этилацетате, спирте, хлороформе.

Принцип метода. Метод основан на определении суми-альфа газожидкостной и тонкослойной хроматографией после извлечения его из исследуемой пробы органическим растворителем, очистки от коэкстрактивных веществ в системе жидкость-жидкость.

Метрологическая характеристика методов. Диапазон определяемых концентраций 0,005 - 0,1 мг/кг (мг/л). Остальные параметры приведены в таблице 81.

 

Таблица 81

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУМИ-АЛЬФА

 

┌─────────────┬────────────────┬─────────────┬────────────────────┐

│Анализируемый│Среднее значение│ Стандартное │   Доверительный    │

│   объект    │ определения, % │отклонение, %│интервал среднего, %│

├─────────────┴────────────────┴─────────────┴────────────────────┤

│                              ГЖХ                                │

│                                                                 │

│Вода         │95,7            │+/- 4,3      │+/- 5,4             │

│Яблоки       │80,0            │+/- 5,2      │+/- 6,0             │

│Картофель    │85,6            │+/- 3,2      │+/- 4,9             │

│                                                                 │

│                              ТСХ                                │

│                                                                 │

│Вода         │80,0            │+/- 5,0      │+/- 7,1             │

│Яблоки       │65,0            │+/- 6,0      │+/- 9,0             │

│Картофель    │65,0            │+/- 5,0      │+/- 7,1             │

└─────────────┴────────────────┴─────────────┴────────────────────┘

 

Избирательность метода. При определении методом ГЖХ могут мешать препараты из группы синтетических пиретроидов; при использовании метода ТСХ могут мешать препараты, обнаруживаемые с помощью аммиаката серебра.

Реактивы и растворы. Для экстракции. Ацетон х.ч. Гексан ч. Сульфат натрия ч.

Для ГЖХ. 5% SE-30 на хроматоне N-AW (0,16 - 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты. Стандартный раствор суми-альфа (2 мкг/мл). Хранят в холодильнике не более 5 дней.

    Для  ТСХ.   Нитрат  серебра.   Пластинки  "Силуфол".   Подвижная   фаза

гексан-ацетон (4:1). Проявляющий реагент - раствор аммиаката серебра (0,5 г

AgNO   растворяют  в  5  мл  дистиллированной  воды,  прибавляют  7 - 10 мл

    3

22,5-процентного  аммиака  и  доводят  объем  раствора до 200 мл ацетоном).

Основной  стандартный  раствор  суми-альфа (200 мкг/мл) в ацетоне. Хранят в

холодильнике не более 2 мес.

Приборы и посуда. Посуда мерная (колбы конические, пипетки, цилиндры и др.). Воронки делительные и конические. Колбы грушевидные, круглодонные на 25; 50 и 250 мл. Аппарат для встряхивания. Лампа ртутно-кварцевая. Камера хроматографическая. Пульверизаторы стеклянные. Испаритель ротационный ИР-1М. Хроматограф "Цвет" или другой марки, снабженный ДПР. Микрошприц МШ-10М на 10 мкл. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм (заполненная носителем на 0,5 - 0,6 м).

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Пробу воды (500 мл) помещают в делительную воронку и дважды экстрагируют суми-альфа гексаном порциями по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе при температуре бани 40 °C до объема 0,3 - 0,5 мл. Досуха отгоняют на воздухе. Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют.

Навеску растительного материала (яблоки, картофель) массой 25 г помещают в коническую колбу, приливают 50 мл смеси ацетон-вода (7:3), встряхивают 30 мин. Экстракцию повторяют дважды, объединяют ацетоновые экстракты, фильтруют и переносят в делительную воронку. Прибавляют 300 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают и реэкстрагируют суми-альфа гексаном дважды порциями по 30 мл. Объединяют гексан, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее хроматографируют.

    Газожидкостная   хроматография.   Применяют   носитель  хроматон   N-AW

(0,16 - 0,20 мм). Неподвижная фаза 5% SE-30. Колонка стеклянная длиной 1 м,

заполненная  носителем  на  0,5 - 0,6 м.   Скорость  газа-носителя  (азота)

                                     -12

50 мл/мин. Шкала электрометра 20 x 10     А.  Температура  (°C):  колонки -

220,  испарителя - 240,  детектора - 250.  Вводимый  объем  5  мкл.   Время

удерживания  15 мин.  18 с,  линейный  диапазон  детектирования  2 - 50 нг.

Минимально детектируемое количество 2 нг.

Тонкослойная хроматография. Пробу, сконцентрированную до объема 0,1 - 0,2 мл, количественно наносят на пластинки "Силуфол". Параллельно наносят серию стандартных растворов с содержанием суми-альфа 3; 5 и 10 мкг.

    Хроматографируют  в  смеси  растворителей  гексан-ацетон  (4:1).  После

высушивания пластинку обрабатывают  раствором  аммиаката серебра и облучают

УФ-светом  30  мин.  Суми-альфа  обнаруживается  в  виде пятна серо-черного

цвета. Величина R  0,4 +/- 0,05.

                 f

Обработка результатов анализа. При использовании метода ГЖХ для количественного определения измеряют площадь основного пика в пробе в стандартном растворе (при условии, что пики близки по величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора). Содержание суми-альфа в пробе (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:

 

                                   C  V S

                                    ст 2 пр

                               X = --------,

                                    S  V P

                                     ст 1

 

    где:

    C   - количество  препарата  во  введенном  в  хроматограф  стандартном

     ст

растворе, мкг;

    S   - площадь пика исследуемого раствора, кв. мм;

     пр

    S   - площадь  пика  стандартного  раствора  препарата,   введенного  в

     ст

хроматограф, кв. мм;

    V  - объем экстракта, введенный в хроматограф, мл;

     1

    V  - общий объем экстракта после упаривания, мл;

     2

    P - масса анализируемой пробы, г.

    При использовании метода ТСХ содержание суми-альфа в пробе вычисляют по

формуле:

 

                                      A

                                  X = -,

                                      P

 

где:

A - количество препарата, найденное на пластинке, в пробе, мкг;

P - навеска пробы, г или мл.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.