Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 5037-89

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КОРБЕЛЯ В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТЕНИЯХ ПШЕНИЦЫ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

    Краткая    характеристика   препарата.   Корбель   -   4-[3(4-

(1,1-диметилэтил)-фенил)]-[2-метил]пропил-2,6цис-диметил-морфолин.

Брутто-формула  C  H  NO.  Молекулярная  масса 303,5. Общепринятое

                 20 33

название   -   фенпропиморф.   Агрегатное   состояние   -  жидкое.

Выпускается  в  виде  концентрата  эмульсии  желтоватого  цвета со

слабым  ароматическим запахом. Плотность 0,943 при 20 °C, довольно

легко  воспламеняется,  горюч.  Содержание  действующего  вещества

составляет    750    г/л.   Растворим   во   многих   органических

растворителях,  плохо  растворим  в  воде. Стабилен в воде, слабых

растворах кислот и щелочей до 24 ч.

Применяется для борьбы с болезнями на озимой и яровой пшенице, яровом ячмене. МДУ в ФРГ на зерновых 0,5 мг/кг. Срок ожидания - 35 дней.

Принцип метода. Метод основан на извлечении корбеля из растительной пробы, почвы или воды экстракцией: из воды - органическим растворителем, из почвы и растений - смесью вода - ацетон (20:1) или подкисленной водой с pH 2 - 3. Переэкстракцию проводят хлороформом или смесью гексан - ацетон (4:1). Определение проводят методом ТСХ.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 147.

 

Таблица 147

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА (P = 0,95, N = 5)

 

┌───────────┬─────────────┬────────────┬─────────┬───────────┬────────────┐

│Анализируе-│  Диапазон   │   Предел   │Среднее  │Стандартное│Доверитель- │

│мый объект │определяемых │обнаружения,│значение │отклонение,│ный интер-  │

│           │концентраций,│ мг/кг или  │определе-│     %     │вал, %      │

│           │     мкг     │    мг/л    │ния, %   │           │            │

├───────────┼─────────────┼────────────┼─────────┼───────────┼────────────┤

│Вода       │10 - 50      │0,04        │86       │+/- 5,8    │+/- 7,2     │

│Почва      │10 - 100     │0,1         │82       │+/- 5,3    │+/- 13,3    │

│Растения   │10 - 100     │0,2         │72       │+/- 7,5    │+/- 9,4     │

└───────────┴─────────────┴────────────┴─────────┴───────────┴────────────┘

 

    Реактивы    и    растворы.   Ацетон   особой   чистоты.   Вода

дистиллированная.  Хлороформ   х.ч.    н-Гексан    х.ч.     Этанол

96-процентный,   ректиф.   Бромфеноловый   синий,  водорастворимый

индикатор, ч.д.а.  Лимонная кислота ч.д.а., 1-процентный  раствор.

Конго красный. Нитрат серебра ч.д.а. Сульфат натрия безводный х.ч.

Уксусная кислота ч.д.а., 5-процентный раствор. Пластинки "Силуфол"

УФ   .  Стандартный  раствор  корбеля  (0,1  мг/мл  в  этаноле или

  254

ацетоне).  Проявляющий реагент: N 1 - 0,4-процентный раствор конго

красного  в  50-процентном  этаноле; N 2 - 0,4-процентный  раствор

бромфенолового  синего  в  ацетоне  и  3-процентный водный раствор

нитрата серебра в соотношении 1:1.

Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Колбы: круглодонные на 250 мл; мерные на 100 мл. Холодильник стеклянный для отгонки растворителя. Баня водяная или ротационный испаритель. Воронки химические и делительные на 500 мл. Цилиндры мерные. Пульверизатор стеклянный. Камера для хроматографирования (эксикатор). Капиллярные пипетки для нанесения проб. Микропипетки на 0,1 мл конические; плоскодонные на 250 мл. Компрессорная установка УК-40-2.

Ход анализа. Экстракция. Пробу воды (250 мл) помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют хлороформом или смесью гексана с ацетоном в соотношении 4:1 порциями по 100, 50, 50 мл в течение 5 мин. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (15 г), концентрируют на водяной бане или ротационном испарителе до 0,3 - 0,5 мл.

    Навеску воздушно-сухой почвы (100 г) или измельченных растений

(50   г)  помещают  в  колбу  для  экстракции,  приливают  100  мл

водно-ацетоновой   смеси   (20:1)   или   дистиллированной   воды,

подкисленной  хлороводородной кислотой до pH 2 - 3, и экстрагируют

корбель  на  аппарате  для  встряхивания  в  течение 30 мин. Затем

экстракт  фильтруют,  экстракцию  повторяют  дважды.  Объединенный

экстракт помещают в делительную воронку на 500 мл. Если экстракцию

проводят  подкисленной  водой,  то  в экстракт добавляют несколько

капель  1  н   раствора  KOH  до  pH 8 - 9, добавляют 100 мл смеси

гексан  -  ацетон  (4:1)  или хлороформа и встряхивают в течение 3

мин.  Переэкстракцию  таким  же объемом растворителя повторяют еще

дважды. Экстракт собирают в круглодонную колбу через воронку с 15%

безводного  сульфата натрия. Растворитель отгоняют на водяной бане

или  ротационном  испарителе  до объема 0,5 мл. Остаток наносят на

тонкий слой пластинок "Силуфол" УФ   . Справа от пятна исследуемой

                                  254

пробы  наносят стандарт с известной концентрацией корбеля. Диаметр

нанесенного пятна не должен превышать 1 - 1,5 см.

    Хроматографирование.  Пластинку с нанесенными пробами помещают

в  хроматографическую  камеру  с  системой  растворителей гексан -

ацетон  (1:1)  или  гексан  -  ацетон  -  0,5  н  уксусная кислота

(1:2:0,1). Когда фронт растворителя поднимется до 10 см, пластинку

вынимают  и  оставляют  на  несколько  минут на воздухе до полного

испарения  подвижного растворителя. Пластинку опрыскивают одним из

проявляющих  реагентов.  После опрыскивания пластинку помещают под

источник  УФ-света - лампу ПРК-4. На светло-сером фоне проявляются

малиновые  пятна  корбеля  с  R   0,87.  Для большей контрастности

                               f

пластинку  можно  оросить 1-процентным раствором лимонной кислоты,

после  чего  на  сине-сером  фоне  четко проявятся малиновые пятна

корбеля. После опрыскивания бромфеноловым  реагентом  и  обработки

5-процентным раствором уксусной  кислоты  на желтом фоне пластинки

проявляются пятна корбеля синего цвета.

    Обработка   результатов  анализа.  Количественное  определение

проводят  путем  сравнения  интенсивности окраски и размеров пятен

пробы  и  стандартных растворов. Содержание препаратов в пробе (X,

мг/кг) рассчитывают по формуле:

 

                                  A

                              X = -,

                                  P

 

где:

A - найденное количество корбеля в пробе, мкг;

P - навеска пробы, г.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать меры безопасности, принятые для работы с легковоспламеняющимися жидкостями и ядовитыми веществами.