Утверждены

Минздравом СССР

4 октября 1989 г. N 4698-88

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПРОМЕТА В РАСТЕНИЯХ, ПОЧВЕ

И ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

 

--------------------------------

<*> Разработаны Л.И. Бублик, Н.В. Федоренко (УкрНИИЗР). Рекомендованы группой экспертов.

 

    Краткая     характеристика     препарата.      Действующее     вещество

промета  -  N-(N-бутоксикарбонил-N-метиламиносульфенил)-O-(2,3-дигидро-2,2-

диметилбензофурил-7)-N-метилкарбамат.     Брутто-формула       C  H  N O S.

                                                                18 26 2 5

Молекулярная    масса   382,5.   Общепринятое   название   -   фуратиокарб.

Растворимость   в  воде  при  20  °C  -  10  мг/л.  Растворим  в  метаноле,

изопропаноле,  н-октаноле, ацетоне, циклогексане,  метиленхлориде, толуоле,

гексане, хлороформе.

Промет - экспериментальный системный почвенный инсектицид контактного и кишечного действия против комплекса почвообитающих вредителей кукурузы, картофеля и других культур. Обладает нематоцидными свойствами. Промет разлагается в растениях и почве с образованием карбофурана.

Принцип метода. Метод основан на извлечении промета и его метаболитов из исследуемой пробы хлороформом, гексаном или водой, подкисленной хлороводородной кислотой до pH 3; очистке экстракта путем перераспределения в двух несмешивающихся растворителях и определении препарата методом хроматографии в тонком слое.

Метрологическая характеристика метода. Минимальное детектируемое количество фуратиокарба и карбофурана 0,1 мкг. Предел обнаружения в воде 0,0004 мг/л, почве - 0,001 мг/кг, свекле, озимой пшенице (зеленая масса), зерне - 0,03 мг/кг, картофеле (клубни) - 0,05 мг/кг, свекле (обработанные семена) - 0,5 мг/кг. Среднее значение определения 82 - 95%.

Избирательность метода. Метод специфичен.

    Реактивы  и  растворы.  Ацетон  х.ч. н-Гексан ч. Этиловый спирт ректиф.

Хлороформ    х.ч.   Хлороводородная   кислота.   Уксусная   кислота.   Вода

дистиллированная.  Сульфат  натрия  безводный  ч.д.а.  Гидроксид калия х.ч.

Йодид  калия  х.ч.  Перманганат  калия  ч.д.а.  п-Нитроанилин ч.д.а. Нитрит

натрия  х.ч.  Соли  диазония:  прочный  синий Б, прочный красный Б, прочный

голубой    Б    (бис-диазотированный    о-дианизидин).    о-Толидин    х.ч.

2,6-Дибром-N-хлорхинонимин.     Пластинки     "Силуфол"    УФ   .    Бумага

                                                             254

фильтровальная.  Фуратиокарб  99,8-процентный.  Карбофуран 99,8-процентный.

Промет  40-процентный   с.п.   Стандартные   растворы   для   приготовления

стандартных растворов  (0,1-процентный) 0,025 г  99,8-процентных препаратов

или 0,063 г  40-процентного с.п. растворяют в 25 мл ацетона. В мерную колбу

на 100 мл переносят 10 мл полученного раствора и ацетоном доводят до метки.

Хранят  растворы  в  темных  склянках с притертыми  пробками в холодильнике

2  мес.  Проявляющие   реагенты:   15-процентный  спиртово-водный   раствор

гидроксида  калия  (15 г  KOH  растворяют  в 60 мл  этанола и 40 мл  воды);

0,01-процентный  раствор  соли  диазония  в  ацетоне  (0,01 г соли диазония

растворяют  в  100  мл  ацетона).   Хранят  в  темной   склянке   3   сут.;

0,5-процентный  раствор   2,6-дибром-N-хлорхинонимина   в  гексане  (0,5  г

2,6-дибром-N-хлорхинонимина  растворяют  в 100 мл гексана);  0,1-процентный

раствор   п-нитроанилина  в  0,1  н    хлороводородной   кислоте    (0,1  г

п-нитроанилина   растворяют   в  100  мл  0,1 н  раствора   хлороводородной

кислоты); 4-процентный водный раствор нитрита натрия  (4 г NaNO  растворяют

                                                               2

в 100 мл дистиллированной воды); раствор для хлорирования (смешивают равные

объемы   3-процентного   раствора   перманганата  калия  и  хлороводородной

кислоты).  Хранят  в  холодильнике;  0,2  г  о-толидина  растворяют  в 2 мл

уксусной  кислоты,  0,8 г  йодида  калия - в  2  мл  дистиллированной воды.

Растворы смешивают и доводят водой до 200 мл.

    Приборы  и  посуда.  Весы  аналитические  и  технические.  Аппарат  для

встряхивания.  Вакуумный  насос.  Хроматоскоп. Электроплитка. Водяная баня.

Колбы:  мерные  на  100 мл; плоскодонные на 250 мл; круглодонные на 250 мл.

Мерные  цилиндры  на  50 мл. Микропипетки на 0,1 мл. Воронки делительные на

200;  500  мл.  Эксикатор.  Камера  для  хроматографирования. Пульверизатор

стеклянный для обработки пластинок. Пластинки "Силуфол" УФ   .

                                                          254

Ход анализа. Экстракция. В делительную воронку помещают 250 мл воды. Экстрагируют промет и его метаболиты хлороформом (2 раза порциями по 50 мл) или гексаном (3 раза по 50 мл), встряхивая каждый раз по 5 мин. Растворитель сливают через фильтр с 15 г безводного сульфата натрия в круглодонную колбу и отгоняют на ротационном испарителе или водяной бане при температуре воды в ней 30 °C до объема 0,2 - 0,5 мл.

Почва (чернозем). Навеску (50 г) воздушно-сухой почвы (чернозема) растирают в фарфоровой ступке, переносят в коническую колбу и заливают 100 мл воды, подкисленной хлороводородной кислотой до pH 3. Встряхивают 20 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр в делительную воронку и дважды проводят реэкстракцию хлороформом порциями по 50 мл или трижды гексаном порциями по 50 мл. Далее поступают так же, как и при экстракции воды.

В коническую колбу помещают 20 г измельченного образца сахарной или кормовой свеклы (зеленая масса, корнеплоды), озимой пшеницы (зеленая масса, зерно урожая) и заливают 200 мл воды, подкисленной до pH 3. Встряхивают 20 мин. Экстракт отфильтровывают в делительную воронку. Проводят реэкстракцию, как описано выше. Экстрагируемые примеси не мешают определению.

В коническую колбу помещают 0,2 г обработанных семян сахарной или кормовой свеклы и заливают 20 мл хлороформа. Встряхивают 20 мин. Экстракт переносят через воронку с бумажным фильтром с 10 г безводного сернокислого натрия в круглодонную колбу и отгоняют хлороформ на ротационном испарителе или на водяной бане до 0,2 - 0,5 мл. Остаток переносят через воронку в мерную пробирку, промывают колбу хлороформом и доводят объем экстракта до 5 мл. Аликвоту наносят капилляром (5 - 10 мкл) на пластинку.

В коническую колбу переносят 50 г измельченного образца клубней картофеля, заливают 100 мл хлороформа или гексана (2 x 100 мл), экстрагируют при встряхивании 20 мин. Полученный экстракт переносят через воронку с бумажным фильтром и 15 г безводного сернокислого натрия в круглодонную колбу, отгоняют растворитель на водяной бане и остаток сушат досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл дистиллированной воды, переносят в делительную воронку и проводят реэкстракцию дважды по 30 мл хлороформа. Дальнейшие операции проводят, как описано выше.

    Хроматографирование.   После   отгонки   растворителя  остаток  наносят

капилляром  в  центр  пластинки с силуфолом на расстоянии 1,5 см от нижнего

края.  Слева  и  справа  микрошприцем или микропипеткой наносят стандартные

растворы  промета  с  содержанием  0,5 - 20 мкг. Затем пластинку помещают в

хроматографическую камеру с подвижной фазой, которой служит смесь н-гексана

с  ацетоном  в  соотношении  3:2  или  хлороформ.  Когда фронт растворителя

поднимается  на  высоту  10  см,  пластинку  вынимают  и  сушат на воздухе.

Пластинку  облучают УФ-светом 2 - 3 мин., после чего на белом фоне сорбента

проявляются   желтые   пятна   промета  и  метаболитов,  затем  опрыскивают

проявляющим  реагентом N 1,  подсушивают на воздухе и опрыскивают реагентом

N 2  (цвет  пятен  малиновый)  или  N 3  (цвет  пятен  синий)  либо  смесью

реагентов  N 4  и  N 5  в соотношении 10:1 (цвет пятен бордовый). Обработав

пластинку  парами  хлора (реагент N 6), проветрив ее, опрыскивают реагентом

N 7. Промет и карбофуран при этом  проявляются в виде сине-фиолетовых пятен

на сером фоне. В  подвижной фазе  гексан-ацетон (3:2) для промета  R  0,65,

                                                                    f

для карбофурана R  0,50. В хлороформе R  промета 0,50, а карбофурана 0,30.

                 f                     f

    Обработка результатов анализа.  Содержание  промета (X, мг/кг или мг/л)

определяют  сравнением  площади  пятен  стандартов и проб и рассчитывают по

формуле:

 

                                     AS

                                       2

                                 X = ---,

                                     PS

                                       1

 

    где:

    A - количество препарата в анализируемой пробе, мкг;

    P - масса анализируемой пробы, г;

    S   и  S   -  площади пятен соответственно стандартного и анализируемых

     1      2

растворов, кв. мм.

Требования безопасности. Необходимо выполнять все требования безопасности работы с токсичными веществами, кислотами и щелочами.